Hvordan reducerer filtrerede pipettespidser adsorption af RNA og andre følsomme biomolekyler?

Filtrerede pipettespidser spiller en afgørende rolle i molekylærbiologi og bioteknologi, især når man arbejder med RNA og andre følsomme biomolekyler. Disse biomolekyler beskadiges let af fysisk, kemisk eller biologisk forurening, så det er afgørende at reducere deres tab og forurening under pipettering. Her er nogle måder at bruge filtrerede pipettespidser til at reducere adsorption af RNA og andre følsomme biomolekyler:
Vælg den rigtige filtermembran:
Vælg filtermembranmaterialer med lave adsorptionsegenskaber, såsom specialbehandlet plast eller silicagel.
Sørg for, at filtermembranen har den passende porestørrelse for at tillade jævn passage af væske og samtidig forhindre kontaminering med partikler og cellerester.
Optimer pipetteringshastighed og tryk:
Langsom og stabil pipeteringshastighed kan reducere adsorptionen af ​​biomolekyler på filtermembranen.
Undgå at bruge for højt tryk eller vakuum, da dette kan øge adsorptionen og ødelæggelsen af ​​biomolekyler på filtermembranen.
Brug RNase-hæmmere:
Til RNA-prøver tilsættes en RNase-hæmmer, såsom DEPC (diethylpyrocarbonat)-behandlet vand eller en specialiseret RNase-hæmmeropløsning, til prøven før pipettering.
Dette hjælper med at reducere RNA-nedbrydning under pipettering.
Opbevar prøver og pipettespidser kølige:
For følsomme biomolekyler kan opretholdelse af lave temperaturer (såsom 4°C) reducere deres nedbrydning og adsorption.
Brug nedkølede pipettespidser og reagenser, eller brug en isboks til at opretholde kolde temperaturer under pipettering.
Reducer pipetteringstid:
Minimer antallet af pipetteringstider for at reducere kontakten og adsorptionen af ​​biomolekyler på filtermembranen.
Hvor det er muligt, skal du bruge større pipetteringsvolumener for at reducere pipetteringstiderne.
Undgå opløsninger, der indeholder overfladeaktive stoffer:
Visse overfladeaktive stoffer kan øge adsorptionen af ​​biomolekyler til filtermembranen.
Prøv at undgå at pipettere med opløsninger, der indeholder overfladeaktive stoffer.
Udskift pipettespidserne regelmæssigt:
Hyppig udskiftning af pipettespidser kan reducere adsorptionen af ​​biomolekyler på grund af ældning eller kontaminering af filtermembranen.
Sørg for at kontrollere integriteten og renheden af ​​pipettespidserne før brug.
Brug dedikerede RNA-behandlingsværktøjer:
Til specifikke RNA-applikationer, såsom RNA-sekventering eller real-time kvantitativ PCR (qPCR), kan du overveje at bruge pipetter og filtre, der er specielt designet til RNA.
Disse værktøjer har generelt lavere RNA-adsorptionsegenskaber og højere følsomhed.
Uddannelse og erfaring:
Korrekt træning og erfaring kan forbedre nøjagtigheden og konsistensen af ​​pipetteringsteknikker og derved reducere tabet og kontamineringen af ​​biomolekyler.
Regelmæssig vurdering af færdigheder og feedback kan hjælpe med at forbedre laboratoriets overordnede præstation.
Laboratorie rengøring og hygiejne:
Opretholdelse af renlighed og hygiejne i laboratoriet er afgørende for at reducere forurening af biomolekyler.
Rengør laboratorieoverflader, udstyr og værktøjer regelmæssigt og følg god laboratoriehygiejnepraksis.